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用于細菌或真菌的涂片染色

【產(chǎn)品名稱】

革蘭染色液

【包裝規(guī)格】

單瓶（桶）包裝規(guī)格為：20ml、50ml、100ml、250ml、500ml、1L、5L

每盒（箱）包裝規(guī)格為：4×20ml/盒、4×50ml/盒、4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒、4×1L/箱、4×5L/箱

【預(yù)期用途】

用于細菌或真菌的涂片染色

【檢驗原理】

革蘭染色法，由丹麥病理學(xué)家Christain Gram于1884年創(chuàng)立，是細菌學(xué)中很重要的鑒別染色法。通過此法染色，可將細菌鑒別為革蘭陽性菌（G+）和革蘭陰性菌（G-）兩大類。細菌的不同顯色反應(yīng)是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異，主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的。經(jīng)結(jié)晶紫染色的細胞用碘液處理后形成不溶性復(fù)合物，乙醇能使它溶解，所以染色的前二步結(jié)果是一樣的，但在G+細胞中，乙醇還能使厚的肽聚糖層脫水，導(dǎo)致孔隙變小，由于結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物分子太大，不能通過細胞壁，保持著紫色。在Gˉ細胞中，乙醇處理不但破壞了胞壁外膜，還可能損傷肽聚糖層和細胞質(zhì)膜，于是被乙醇溶解的結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物從細胞中滲漏出來，當(dāng)再用襯托的染色液復(fù)染時，顯現(xiàn)紅色。紅色染料雖然也能進入已染成紫色的G+細胞，但被紫色蓋沒，紅色顯示不出來。 

【儲存條件及有效期】

0℃-35℃儲存，原包裝未開封染色液的有效期為24個月，在有效期內(nèi)的已開封染色液在開封后6個月內(nèi)使用完，每次用后應(yīng)及時擰緊瓶蓋，以免揮發(fā)或變質(zhì)。

生產(chǎn)日期、有效期詳見外盒或瓶上標(biāo)識。

【樣本要求】

涂片時必須注意細心操作，涂片薄而均勻。制備的涂片應(yīng)自然干燥，采用加熱固定時，固定溫度不宜過高，以背面接觸手背不燙為準(zhǔn)，否則可能使細菌形態(tài)改變影響觀察結(jié)果。

【檢驗方法】

1.涂片：取待檢細菌，于載玻片中央涂成薄層或在載玻片上滴如少許無菌水，取菌與水混合均勻，涂成一薄層；

2.干燥、固定：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫，使之迅速干燥，也可以用甲醇或乙醇固定；

3.初染：滴加結(jié)品紫染色液染色0.5~1.5分鐘，水洗，甩干；

4.媒染：滿加碘溶液覆蓋載玻片0.5~1.5分鐘，水洗，甩干；

5.脫色：滴加脫色液搖動10~30秒，直至流下的脫色液不出現(xiàn)紫色時為止，立即用水沖去脫色液，甩干；

6.復(fù)染：滴加沙黃染色液或復(fù)紅染色液染色20~60s，水洗；

7.濾紙吸干或在空氣晾干，鏡檢。

【檢驗結(jié)果的解釋】

革蘭氏陽性菌呈藍色至紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。